Астено-невротический синдром + 6,2 - - - -

Время развития реакции:

0-30 минут + 56,2 + 88,8 + 100

4-10 часов + 31,2 - - - -

24-48 часов + 18,7 + 11,1 - -

Семейная предрасположенность к развитию ИА + 12,5 + 16,6 - -

Эозинофилия крови + 87,5 + 72,2 + 66,6

Пищевая непереносимость + 25 + 16,6 - -

Т.о., результаты проведенного анализа свидетельствуют о том, что клинические проявления ИА как местного, так и системного характера, со стороны различных органов и систем, наиболее часто отмечаются при ИА к комарам, аллергены которых занимают приоритетное место в формировании ИА. Полученные данные по выявлению особенностей специфической диагностики, дифференциально-диагностических признаков ИА к НН, явилось основанием к созданию алгоритма специфической диагностики и терапии ИА к НН (см. рис.5). Главной задачей созданного алгоритма специфической диагностики и терапии являлась разработка системы целенаправленного этапного отбора больных аллергией к НН, позволяющего прогнозировать выраженный эффект применения АСИТ.

Рис.5 Алгоритм специфической диагностики и терапии ИА к НН

Характеристика IgE-обусловленных форм аллергии к НН.

Полученные результаты свидетельствуют о преимущественном преобладании немедленного типа аллергических реакций при ИА к НН, обусловленному образованием аллерген – специфических IgE, что подтверждается возникновением симптомов через 0-30 минут после укуса (контакта) с НН у большинства больных ИА (к комарам – 56,2%, к тараканам – 88,8%, к хирономидам – 100%), положительными результатами кожных тестов с причинно-значимыми инсектными аллергенами (комаров – 20,5%, тараканов – 33,3%, хирономид- 12,3%), соответствующих 2+- 4+, наличием аллерген – специфических IgE в сыворотках крови больных ИА (к аллергенам комаров – 14,3% (интенсивность связывания М+m = 3,2+0,3), тараканов – 22,1% (М+m= 3,3+0.2), хирономид – 9,6% (М+m = 2,1+0,2).

Полученные данные о приоритетности комаров как источников инсектных аллергенов, обладающих высокой сенсибилизирующей активностью, способствующих формированию и развитию IgE – обусловленной формы ИА, клинические симптомы которой характеризуются наибольшей выраженностью, тяжестью и полиморфизмом проявлений, послужили основанием для проведения АСИТ больным ИА к комарам.

4. Изучение безопасности и клинической эффективности применения АСИТ в лечении больных аллергией к НН (на модели аллергии к комарам).

Разработка методики получения лечебной формы аллергена из комаров (ЛФАК) вида Aedes aegypti.

ЛФАК разработана на основе водно-солевого экстракта тел комаров вида Aedes aegypti (патент РФ N2259846). Одной из задач настоящего исследования состояла в оценке безопасности и терапевтической эффективности лечебного аллергена их комаров.

Разработка документации – НТД-42

В соответствии с требованиями МИБП при МЗ РФ, Комитета по Этике при Федеральном органе Здравоохранения подготовлено: совместно с лабораторией аллергенов Института иммунологии разработана методика приготовления ЛФАК, переданы в ГИСК им Л.А. Тарасевича и осуществлен контроль пяти представленных серий аллергена из комаров Aedes aegypti (лечебная форма), создана Программа испытаний ЛФАК, проект Инструкции по применению ЛФАК, схема проведения АСИТ, разработан Протокол испытаний ЛФАК, информированное согласия пациента, индивидуальная регистрационная карта, дневник самоконтроля пациента, получено разрешение Государственного научно-исследовательского института стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов (ГИСК) им.

Л.А. Тарасевича, Комитета по медицинским иммунологическим препаратам (КМИБП) при МЗ РФ, Комитета по этике, а также Министерства Здравоохранения и социального развития РФ (Разрешение МЗРФ N293 от 6 июля 2004) на проведение клинических испытаний на ограниченном контингенте больных аллергией к комарам. Подготовлен отчет об испытаниях ЛФАК. Отчет утвержден на заседании Ученого совета ГИСК (Протокол N3 от 11. 05. 2006 года), на заседании КМИБП при МЗ РФ (Протокол N5 от 15.06.2006 г.). Оформлен патент на изобретение N 2259846 "Средство и способ специфической иммунотерапии больных аллергическими заболеваниями, имеющих сенсибилизацию к укусам комаров".

Разработка схемы введения ЛФАК больным аллергией к комарам.

В результате проведенной работы создана схема АСИТ, позволяющая получить высокий терапевтический эффект специфического лечения. Разработанная схема апробирована в НКО ГНЦ "Институт иммунологии ФМБА России", аллергологического диагностического центра ГКБ N1 им. Н.И.Пирогова. В настоящей работе отражена та часть исследования, которая была осуществлена на базе НКО ГНЦ "Институт иммунологии ФМБА России".

Проведение АСИТ больным с аллергией к комарам.

Отбор больных ИА к комарам для проведения АСИТ ЛФАК проводился по критериям включения и исключения, указанным в «Программе испытаний ЛФАК» (утверждена ГИСК им. Л.А.Тарасевича МЗ РФ и Минздравом РФ, протокол № от 25.06.2004).

Отобрано 10 больных ИА (4 мужчин, 6 женщин), средний возраст которых составил 31,1+ 2,4 лет. Наличие местных кожных проявлений ИА в сезон вылета комаров отмечено у всех пациентов. Симптомы характеризовались возникновением волдырных (70%), буллезных (20%) элементов, очагов гиперпигментации (10%), отечности кожи (d = 7-15 см) (50%), локальной гиперемии (d = 5-10 см), локальной гипертермии, выраженного кожного зуда в месте укуса комаром. У 10% пациентов отмечено развитие анафилактического шока на укус комаром, у 10% – развитие приступа удушья и ринореи, у 30% – развитие острой крапивницы и острого ангиоотека при укусах одним или несколькими насекомыми. Анамнестически средняя длительность заболевания составила 5,4+0,3 года (от 3 до 8 лет). У 60% пациентов отмечено наличие сенсибилизации к бытовым и эпидермальным аллергенам, что допускалось при условии полноценной элиминации причинно-значимых аллергенов. Наличие повышенного уровня эозинофилов в периферической крови в сезон активного вылета комаров отмечено у 80% пациентов, оценка результатов общего анализа мочи показала отсутствие у всех пациентов существенных отклонений от показателей среднестатистической нормы (p< 0,01).

При кожном тестировании у всех больных выявлены положительные результаты постановки prick-тестов с диагностическим аллергеном из комаров вида Aedes aegypti (10000 PNU/мл). Интенсивность проявления кожных проб составила 5-15 мм в диаметре (М+m= 7,8+0,5мм.). При исследовании сывороток крови у всех больных выявлены аллерген – специфические IgE к причинно-значимому инсектному аллергену. Интенсивность специфического IgE – связывания в ИФА составила в среднем 2,35+0,25 IU/ml.

При проведении АСИТ каждый больной получил, согласно разработанной схемы, 36 инъекций ЛФАК, минимальная доза вводимого препарата составила 0, 001 PNU, максимальная – 1000,0 PNU. В двух случаях (20%) схема введения препарата была изменена (интервалы увеличены) в связи с повышенной индивидуальной чувствительностью к препарату (местные реакции в виде умеренно выраженных гиперемии, зуда и отечности).

У всех лиц, принявших участие в исследовании, не было отмечено возникновения симптомов интоксикации (головной боли, повышения температуры, потливости, нарушения сна, анорексии, общего недомогания). Развития системных реакций (АШ, АОК, удушье и др.) не отмечено ни у одного больного, так же как и местных гиперергических реакций (размеры которых превышали бы максимальные, предусмотренные установленной схемой учета реакций, указанной в Программе испытаний), что свидетельствует о безопасности вводимого препарата. Результаты лабораторных показателей общеклинических анализов крови, мочи, данных исследований ФВД, ЭКГ были в пределах нормальных значений, что подтвердило высокую безопасность лечебного аллергена из комаров вида Aedes aegypti

Оценка терапевтической эффективности АСИТ проводилась по окончании сезона вылета комаров. Проявления клинических симптомов ИА оценивали по общепринятой 4 бальной системе. Отличный эффект АСИТ отмечен у 3 больных. Исчезли все проявления ИА, как общего, так и местного характера, а также потребность в симптоматических препаратах. Хороший эффект отмечен у 6 больных. Системных реакций не отмечено, местные симптомы стали редкими, уменьшилась их выраженность, появление симптомов купировались приемом малых доз симптоматических препаратов. Удовлетворительный эффект отмечен у 1 больного. Местные кожные проявления ИА остались, однако снизилась частота появления и их выраженность, вдвое снизилась потребность в симптоматических препаратах. Неудовлетворительного эффекта (отсутствия улучшения) не было отмечено ни у одного больного. Таким образом, отличный и хороший эффект отмечен у 90% пациентов.

Аллергометрическое титрование, проведенное больным после АСИТ показало, что у всех больных в процессе АСИТ имело место снижение кожной чувствительности к специфическому аллергену из комаров более чем в 2 раза ( до лечения М+m= 7,8+0,5мм, после лечения М+м=3,3+0,4 мм (р(0,001)).

Эффективность применения препарата оценивалась также по уровню синтеза аллерген – специфических IgG4 методом ИФА. Отмечено 16-тикратное увеличение титра специфических IgG4-«блок»- АТ после проведенного курса АСИТ (p<0.01), что также свидетельствует об эффективности проведенной терапии

Таким образом, показана безопасность и высокая терапевтическая эффективность аллергена из комаров вида Aedes aegypti (лечебная форма), который может быть рекомендован к расширенному применению при проведении АСИТ

больным аллергией к комарам (рекомендован МИБП МЗ РФ, Протокол N5 от 15.06.2006 г.).

Установлена высокая распространенность аллергии к НН, которая в разных регионах России (Заполярье, Приуралье, Приволжье) составила от 5,9% до 17,5%.

Удельные показатели аллергии к НН в структуре аллергозаболеваний жителей московского региона составляют: к аллергенам тараканов – 15,7%, к аллергенам мотыля (хирономид) – 7,9%, к аллергенам комаров – 14,3%.

Установлено, что в формировании аллергии к НН важная этиологическая роль принадлежит аллергенам комаров, тараканов, хирономид.

Основными клиническими проявлениями аллергии к комарам являются местные (отечность – 37,5%, везикулезные 43,7%, буллезные – 25% элементы, очаги гипер- и депигментации – 18,7%, аллергический конъюнктивит – 18,7%) и системные реакции (анафилактический шок – 12,5%, приступ удушья – 25%, острая крапивница – 18,7%, острый ангиоотек – 37,5%, аллергический ринит – 12,5%, гастроинтестинальный синдром – 12,5%, нефротический синдром – 18,7%, астено-невротический синдром – 6,2%); проявлениями аллергии к тараканам являются респираторные (заложенность носа – 55,5%, приступы удушья – 33,3%) и гастроинтестинальные симптомы (5,5%).

К особенностям местных реакций на укусы комаров относятся: развитие и длительное сохранение (от 2-х недель до 2-х месяцев) очагов гипер- и депигментации в местах укусов (18,7%), развитие гиперемии и зуда в местах прежних укусов (12,5%).

У больных аллергией к комарам встречаемость атопической бронхиальной астмы соответствовала 9,8%, аллергического ринита – 41,9%, атопического дерматита – 5,3%, хронической крапивницы – 11,6%, что существенно не отличается от показателей распространенности АЗ в общей популяции населения московского региона.

Разработан, утвержден к применению (Разрешение МЗРФ на проведение клинических испытаний препарата №293 от 6 июля 2004 г.) и апробирован новый отечественный аллерген из комаров вида Aedes aegypti (лечебная форма (ЛФАК)); составлена научно-техническая документация (НТД-42), Программа испытаний и проект Инструкции по применению препарата, оригинальная схема проведения АСИТ ЛФАК (Патент РФ №2259846).

Впервые проведена АСИТ больным аллергией к комарам и показана высокая безопасность и терапевтическая эффективность применения ЛФАК (отличный и хороший эффект отмечен у 90% пациентов). Препарат рекомендован к расширению сферы применения (Протокол № 5 МИБП от 15.06.2006).