Delist.ru

Кандидоз, аспергиллез и мукороз животных (диагностика и меры борьбы) (25.12.2006)

Автор: Агольцов Валерий Александрович

б) в сычуге – слизистая оболочка некротизирована, в подслизистом слое на границе с мышечным слоем нередко мощная зона из скопления клеточных элементов.

Наиболее частая локализация грибов и особенности их морфологии в тканях:

кандидозы – обнаруживаются в плоском многослойном эпителии слизистой оболочки преджелудков, больше на верхушках и периферии сосочков, но иногда и в их основе в виде пучков псевдомицелия с отпочковывающимися круглыми или удлиненными клетками.

аспергиллезы – врастают в слизистую оболочку в различных направлениях; обнаруживаются во всех слоях стенки преджелудков, в кровеносных сосудах, в гранулемах легких; гриб ветвистый с вздутиями на концах и по ходу мицелия; в толще тканей гриб органы плодоношения не образует.

мукорозы – всегда обнаруживаются в кровеносных сосудах; в тканях нередко выявляются шаровидные образования с короткими гифами голубоватого цвета, напоминает полые трубки; органы плодоношения в тканях не образует.

Экспериментальные кандидозы, аспергиллезы и

мукорозы

Особенности течения микозов при различных путях заражения

Кандидозы.

Для воспроизведения кандидоза лабораторных животных заражали спорами трехсуточной агаровой культуры патогенного штамма C.albicans (№74-70) с концентрацией 3х109 спор/мл. Объем вводимой суспензии для морских свинок и кроликов 1см3. При пероральном способе заражения животным на слизистую ротовой полости предварительно апплицировали ампициллин из расчета 50000ЕД на 1кг живой массы один раз в день три дня подряд перед скармливанием культуры патогенного штамма C. albicans. Пероральное заражение только культурой заболевание вызывало крайне редко. Клинические признаки заболевания животных: отказ от корма, угнетение, взъерошенность шерстного покрова, отмечали после внутривенного (внутрисердечного) заражения на 2-3-е сутки, после перорального – на 5-е сутки. Гибель морских свинок после внутрисердечного заражения была на 5-6-е сутки, кроликов после внутривенного – на 6-9-е сутки. После перорального заражения в состоянии истощения морские свинки гибли на 9-10-е сутки, кролики – на 15-16-е сутки.

Аспергиллез.

При внутривенном заражении кроликов культурой штамма A. fumigatus №21-91 дозе 1х106 спор/мл и объеме 1см3 первые признаки заболевания аспергиллезом регистрировали на 3-4-е сутки, которые проявлялись снижением аппетита до полного его отсутствия, вялостью и тусклостью шерстного покрова. За 24-36 часов до гибели наблюдали парезы задних конечностей, смерть наступала через 3-7 суток после появления первых клинических признаков, и сопровождалась судорогами и параличами задних конечностей.

С целью усиления патогенного действия аспергилл подопытным кроликам также апплицировали ампициллин в тех же дозах и по той же схеме, что и при заражении грибами рода Candida. В результате было достигнуто течение заболевания, повторяющее основные характеристики естественного переболевания животных аспергиллезом.

После перорального заражения клинические признаки появлялись через одну-две недели после последнего заражения или за 7-10 дней до гибели. Падеж кроликов сопровождался признаками нарушения функций центральной нервной системы (судороги и параличи). Во всех случаях отмечали расстройство пищеварения, проявляющееся диареей. У некоторых выживших животных течение болезни принимало хроническую форму. При данной форме болезни наблюдали парезы задних конечностей, тонические и клонические судороги различных групп мышц. Выжившие кролики имели меньшую (на 30-40%) массу тела и сниженный аппетит.

Нами предложен интрагастральный способ заражения кроликов с помощью медицинского уретрального катетера. Использование катетера позволило доставлять культуру возбудителя аспергиллеза непосредственно в желудок, а также проводить дозирование заражающего материала. Для возникновения заболевания достаточно было трехкратного введения смывов культуры штамма (№21-91) A. fumigatus, перед кормлением, в объеме 10 см3 и содержанием спор 1х106клеток/мл. Интрагастральное заражение, как правило, характеризовалось расстройством пищеварения и теми же клиническими признаками, что и при пероральном инфицировании.

Признаками заболевания при аэрогенном заражения были: слизисто-гнойные истечения из носовых ходов, отставание в весе на 10-15% по сравнению с контролем.

Мукороз.

При внутривенном заражении кроликов в дозе 1х106спор/мл и объеме суспензии 1см3 первые признаки заболевания мукорозом проявлялись на 4-5-е сутки после введения культуры вирулентного штамма № 55-91 M. racemosus. Клинические симптомы были схожи с аспергиллезом и характеризовались сильным угнетением и нарушением координации движения. Животные погибали через 4-7 суток после появления первых признаков заболевания.

Алиментарное заражение с одновременной дачей антибиотика (ампициллина) вызывало диарею, угнетение, снижение аппетита и массы тела и гибель до 30% кроликов через 20-37 суток. Первые симптомы заболевания проявлялись через 7-10 дней после последнего (третьего) заражения. При интрагастральном заражении заболевание сопровождалось диареей и снижением массы кроликов на 20-30%.

Аэрогенное заражение вызывало хроническое течение.

Таким образом, клиническая картина висцеральных микозов, а также исход заболеваний зависят от способов и путей заражения.

Оценка гематологических, иммунологических и биохимических показателей в зависимости от способов заражения возбудителями висцеральных микозов

Кандидоз.

При внутривенном заражении исследования крови проводили на 4-5-е сутки после инфицирования. Было отмечено, что в этот период болезни содержание гемоглобина снижается со 132 до 111 г/л. Количество сегментоядерных лейкоцитов уменьшается с 34 до 14%. Отмечено и понижение уровня Т-общ. лимфоцитов с 56 до 48%; Т-с. лимфоцитов с 19до 4%; В-лимфоцитов с 10 до 6% и (-глобулина с 20 до 15%. В то же время зарегистрировано повышенное количество лейкоцитов с 5,4 до 7,1х109/л. ; увеличение числа моноцитов с 4,1 до 12,3; лимфоцитов с 55,5 до 66,8%; Т-акт. лимфоцитов с 39,7 до 47,1%; Т-х. лимфоцитов с 37,1 до 42,7%, соотношения Тх/Тс с 2,1 до 9,3; ЦИКов с 2,1 до 5,9 у.е., ?-глобулинов с 6,4 до 7,1%.

При пероральном заражении и аппликации ампициллина анализ крови проводили на 10-12-е сутки после инфицирования. У кроликов в этот период было зарегистрировано снижение числа сегментоядерных лейкоцитов с 31,7 до 14,4%, а так же В-клеточных лимфоцитов с 11,4% до 6,1%; общего белка с 68,4 до 46,9%; глобулинов с 36,1 до 31,4% и его фракций. Отмечено и повышение: количества эритроцитов с 5,9 до 6,8х1012/л содержания гемоглобина со 128 до 140 г/л; количества лейкоцитов с 6,2 до 7,1х109/л; палочкоядерных лейкоцитов с 3,8 до 6,7%; моноцитов с 5,8 до 12,6%; лимфоцитов с 56,2 до 64,1%; Т-общ. с 52,7 до 64,1%; Т-акт. с 34,1 до 53,7%; Т-х. с 35,8 до 48,6%, соотношения Тх/Тс с 2,3 до 7,4% и ЦИКи с 1,3 до 4,8у.е.

Аспергиллез.

При внутривенном заражении аспергиллами исследования крови проводили на 5-6-е сутки после инфицирования. При этом было установлено, что количество эритроцитов не значительно увеличивается, оставаясь в границах физиологической нормы (с 5,1 до 6,3х1012/л), отмечен также и лейкоцитоз (с 6,7 до 9,0х109/л). В лейкоформуле – базофилия (с 0,2 до 2,3%), моноцитоз (с 4,3 до 18,2%) и нейтропения со сдвигом ядра влево.

Иммунологическими исследованиями установлено увеличение всех исследуемых популяций Т-лимфоцитов (кроме Т-с): Т-общ. с 35,1 до 60,7%; Т-акт. с 23,4 до 42,6%; Т-х с 23,4 до 57,6%; соотношение Тх/Тс с 2,3 до 13,6; уровень Т-с практически не изменялся. Прежние показатели были и при определении количества В-лимфоцитов. При исследовании белка установлено нарушение альбумино-глобулинового соотношения, причем увеличение глобулинов происходило за счет повышения ? и ? фракций и лишь незначительно ?-глобулинов. Отмечен повышенный уровень ЦИКов (с 1,2 до 14,6у.е.). Остальные показатели значимо не изменялись.

При аэрогенном заражении исследования крови проводили через 20-25 суток после завершения трехкратного аэрозольного инфицирования кроликов. Установлено, что к этому времени происходит снижение количества эритроцитов (с 5,5 до 4,6х1012/л); лейкоцитов – с 6,7 до 4,0х109/л; гемоглобина – с 147 до 116 г/л, достоверного снижения цветного показателя не отмечено. В лейкоформуле – моноцитоз (с 4,3 до 10,2%); лимфоцитоз (с 63,1 до 78,7%).

Исследования иммунологических показателей выявили увеличение Т-общ. лимфоцитов (с 48,5 до 71,8%); Т-акт. – с 36,7 до 53,9%; Т-х. – с 39,8 до 63,8% и ЦИКов – с 1,1 до 12,0 у.е. При исследовании белка установлено нарушение альбумино-глобулинового соотношения, причем увеличение глобулинов происходило за счет повышения ? и ? фракций и лишь незначительно ?-глобулинов. Остальные показатели (Т-с, В-л) практически не изменялись.

Течение заболевания и изменения ряда показателей крови кроликов при интрагастральном заражении аспергиллами имеет свои особенности. Количество эритроцитов наоборот увеличивалось (с 5,9 до 7,2х1012/л), то же самое происходило и с лейкоцитами (с 5,4 до 6,7х109/л) и с содержанием гемоглобина (с 124 до 142 г/л). В лейкоформуле – слабо выраженное увеличение палочкоядерных с одновременным снижением количества сегментоядерных нейтрофилов.

Выявлено увеличение Т-общ. лимфоцитов, Т-акт., Т-х. и ЦИКов. Содержание В-лимфоцитов не изменялось. Установлено снижение уровня общего белка крови за счет сокращения доли альбуминовой фракции. Количество глобулинов повышалось за счет увеличения всех фракций.

Мукороз.

При внутривенном заражении мукором анализ крови проводили на 5-6-е сутки после инфицирования. Исследования показали, что изменения гематологических показателей схожи с нарушениями в составе крови, отмеченные при аспергиллезе, вызванном интравенозным способом заражения, то есть также происходило увеличение количества эритроцитов (с 5,0 до 6,2х1012/л), лейкоцитов – с 6,4 до 8,9х109/л; незначительным снижением количества гемоглобина. В лейкоформуле отмечена нейтропения с возрастанием числа палочкоядерных лейкоцитов и моноцитоз (с 4,2 до 14,5%).

При оценке результатов исследований иммунологических и биохимических показателей установлено повышение уровня Т-общ. (с 37,5 до 60,2%); Т-акт. – с 24,0 до 53,0%; Т-х. с 25,5 до 67,8%; соотношения Т-х./Т-с. c 2,2 до 7,8 и В-лейкоцитов с 1,9 до 10,8%, а также возрастание ЦИКов с 0,9 до 13 у.е. Отмечено снижение содержание Т-с. лимфоцитов с 12 до 7,7%.

Изменения показателей крови кроликов, через 20-25-е сутки после аэрогенного заражения, характеризовались снижением количества эритроцитов с 5,1 до 4,0х1012/л; гемоглобина – с 139 до 109 г/л, лейкоцитов – с 6,0 до 4,0х109/л. В лейкоформуле – моноцитоз (с 2,3 до 9,7%) и нейтропения.

Увеличение Т-общ. составило с 50,4 до 73,5%; Т-акт. с 26,5 до 55,3%; Т-х. с 38,1 до 67,8%; ЦИКов с 1,1 до 12,0%. Субпопуляция Т-с. сокращалась в среднем в 2 раза. Повышение уровня глобулинов происходило за счет равномерного увеличения всех составляющих фракций.

Интрагастральное заражение вызывало ответную реакцию, схожую с аспергиллезом, однако, выражена она была несколько сильнее.

Таким образом, ответная реакция макроорганизма, проявляющаяся изменениями гематологических, иммунологических и биохимических показателей зависит от вида возбудителя микозов и от путей заражения.

Локализация поражений и тканевая реакция при экспериментальных кандидозах, аспергиллезах и мукорозах в зависимости от способов заражения

загрузка...