Уровень РОФ (?1-ингибитор протеаз, орозомукоид), иммунных комплексов, компонентов комплемента С3, С4 содержание иммноглобулинов (IgA, IgM, IgG) определяли с использованием турбодиметрического метода на приборе «Турбокс» фирмы «ORION DIAGNOSTICA» (Финляндия) с помощью тест-систем этой же фирмы. Секреторный иммуноглобулин А (sIgA) определялся с использованием тест-систем Института вакцин и сывороток им. Гамалеи. Определение активности лизоцима в слезной жидкости проводили по стандартной методике (Бухарин О.В., Васильев Н.В., 1974). Определение количества IL-1?, IL-1?, TNF-?, IL-8 в сыворотке крови и слезной жидкости проводилось методом иммуноферметного анализа с использованием тест-систем ООО «Цитокин» (С.-Петербург).

Биохимические исследования слезной жидкости у больных с БК были выполнены у 129 больных в динамике по стандартным методикам, адаптированным к малому объему биологического материала и с соответствующей корреляцией расчетов. Определяли содержание молочной (МК), пировиноградной кислоты – (ПВК), активность лактатдегидрогеназы – (ЛДГ), соотношение содержания молочной кислоты к пировиноградной (МК / ПВК)

Активность процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) оценивали по концентрации диеновых конъюгатов (ДК), кетодиенов с сопряженными триенами (КД с СТ), шиффовых оснований (ШО), малонового диальдегида (МДА) (Каган В.Е.,1986). Состояние антиоксидантной системы оценивали по активности фермента супероксиддисмутазы (Журкин А.Г., 1986) и каталазы (Королюк М.А., Иванова Л.И., Майорова И.Г., 1998).

Статистическая обработка результатов

Результаты проведенных исследований обработаны методами вариационной статистики с вычислением средней арифметической (М), стандартной ошибки среднего арифметического (m). Для проверки достоверности различий средних значений выборок, имеющих распределение, близкое к нормальному, и равенство дисперсий, использовались стандартные методы параметрической статистики для данных (критерии Фишера и Стьюдента). При отклонении от нормального распределения данных, при неравенстве числа наблюдений в сравниваемых группах и малом объеме выборки использовались непараметрические критерии (Колмагорова–Смирнова, Манна–Уитни, Вальда–Вольфовича) для двух независимых выборок. Различия считались достоверными при р<0,05. Статистическая обработка результатов проводилась с использованием прикладного пакета программы Statistica 6.0 (Stat Soft Inc.). Корреляционный анализ проводился по Спирмену. Математическая модель прогноза течения бактериального кератита рассчитана на основе регрессионного анализа.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

В результате проведенного клинико-иммунологического, микробиологического, биохимического, морфологического исследования обоснована клиническая классификация бактериального кератита с выделением двух форм (первичной и вторичной), и трех фаз течения кератита (I – воспалительной, II – пролиферативной, III – реорганизации рубца и эпителизации роговицы). Обследовано 90 пациентов с первичной (возникающей в результате микротравмы здоровой роговицы) и 222 – с вторичной (протекающей на фоне дистрофических изменений роговицы) формами бактериального кератита.

Изучение анамнеза позволило установить особенности факторов риска возникновения первичной и вторичной форм бактериального кератита, к которым относятся наличие или отсутствие фоновых заболеваний глаз, очагов хронической инфекции, микротравм, количественный и качественный состав микрофлоры конъюнктивальной полости, возраст пациентов.

Установленные факторы риска развития первичной и вторичной форм БК представлены в таблице 1.

Таблица 1

Факторы риска возникновения различных форм БК

Факторы риска Клинические формы БК

первичная вторичная

абс % абс %

Микротравма без инородного тела роговицы 25 27,8% 2 0,9%*

Микротравма с инородным телом роговицы 32 35,6% 1 0,5%*

Непроникающее ранение роговицы 8 8,9% 1 0,5%*

Постконтузионная эрозия 5 5,5% 1 0,5%*

Контактная коррекция 15 16,7% 0 0

Фоновые заболевания глаз 4 4,4% 217 97,6%*

Причина не известна 1 1,1% 0 0

Всего 90 100% 222 100%

Примечание: * - значимость различий (р < 0,05) при сравнении показателей:

относительно первичной формы БК.

Данные таблицы показывает, что наиболее частыми причинами возникновения первичной формы БК является травматическое повреждение роговицы: микротравма (с инородным телом -35,6%, без инородного тела - 27,8%), реже - несоблюдение режима контактной коррекции (16,7%). При этом наличие фоновых заболеваний глаз на начальных стадиях установлено только у 4,4% пациентов. Практически первичная форма бактериального кератита развивалась вследствие инфицирования ранее здоровой роговицы в период острой травмы (микротравмы).

Напротив, при вторичной форме бактериального кератита основными факторами развития заболевания у 97,7% пациентов явились фоновые, длительно текущие заболевания глаз, приводящие к дистрофии роговицы: буллезная кератопатия при глаукоме, эндотелиально-эпителиальная дистрофия роговицы, рубцовые помутнения роговицы после перенесенных кератитов воспалительного или травматического характера.

Существенные различия установлены в характере этиологических микробных факторов при первичной и вторичной формах заболевания. Бактериологические исследования отделяемого конъюнктивальной полости при первичной форме БК установили рост микрофлоры у 98,9% пациентов, при этом, монокультура составила 92,3%, смешанная флора – 5,5%. Преобладал рост патогенных бактерий (Pseudomonas aeruginosa - 30,5%, Staphylococcus aureus - 42,7%) с высокой (84,1%) степенью интенсивности роста (КОЕ >103). Смешанная микрофлора в большинстве случаев представлена ассоциацией S. aureus и S. еpidermidis.

При вторичной форме БК рост микрофлоры установлен у 86,1% пациентов, при этом, монокультура составила 82,4%, смешанная флора – 3,7%. Преобладал рост условно-патогенных видов S. epidermidis (45%), Е. сoli (13,1%), S. saprofiticus (3,3%), а также Str. viridans (4,9%). Смешанная микрофлора была представлена в большинстве случаев ассоциацией S. epidermidis и Corynebacterium jeikeum. Высокая степень обсемененности (КОЕ >103) конъюнктивы наблюдалась у 72,7% пациентов.

Отличались группы пациентов с первичной и вторичной формой заболевания и по возрасту. Возрастной состав пациентов с клинически разными формами бактериального кератита представлен в таблице 2.

Таблица 2

Распределение пациентов при различных клинических формах бактериального кератита по возрасту

БК Возрастные группы

До 18*лет

19-39 лет 40-59 лет 60-79 лет 80 лет и старше Всего

абс % абс % абс % абс % абс %

первичная 6 6,7 49 54,4 25 27,8 9 10 1 1,1 90

вторичная 0 0 8 3,6 22 9,9 165 74,3 27 12,2 222

Примечание:

*- среди них детей: 10 лет – 1; 15 лет – 1; 16 лет – 2, 18лет - 2.

Как видно из таблицы, первичная форма БК в большинстве случаев встречается в более молодой возрастной группе (19-39 лет), реже в возрасте 40-59 лет, тогда как вторичная форма БК, напротив, чаще наблюдается в возрасте старше 60 лет. Следует отметить, что заболевание в возрастной группе до 18 лет выявлено только при первичной форме бактериального кератита.