Delist.ru

Современные биотехнологический процессы и иммунологические методы при промышленном производстве ветеринарных препаратов (09.01.2008)

Автор: Гринь Светлана Анатольевна

на культуре клеток СП

1 Ангарское Монтанид 103 90

10 68,0+5,0 1,6+0,1

2 Ангарское Ланолин 85

15 68,0±4,0 2,0+0,2

3 Ангарское Сорбитанолеат 90

10 83,0+6,0 3,1+0,3

4 Маркол 52 Монтанид 103 90

10 40,0+4,0 1,4+0,1

5 Маркол 52 Ланолин 85 15 41,0+4,0 1,8+0,2

6 Маркол 52 Сорбитанолеат 90

10 46+3,0 3,0+0,3

Из полученных результатов этих исследований видно, что между двумя способами оценки токсичности масляных адъювантов и их компонентов, с использованием белых мышек и культуры клеток СП в пробирках с монослоем, существует корреляция. Причем способ оценки токсичности с использованием культуры клеток СП в монослое в пробирках на один-два порядка чувствительней, чем в случае исследований на белых мышках.

2.2.11. Получение специфических гипериммунных сывороток для изготовления диагностикумов с использованием подобранных адъювантов по токсичности, которую определяли на культуре клеток

При получении специфических гипериммунных сывороток с целью изготовления из них диагностикумов использовали масляные адъюванты. Отбор менее токсичных, но обладающих высокой иммунизирующей активностью, проводили с использованием разработанного нами метода с использованием пробирок с культурой клеток СП в монослое. В таблице 10 приведены данные активности гипериммунных сывороток, полученных с применением отобранных адъювантов, при иммунизации вирусами ИРТ, ПГ-3, бешенства, РС, ящура, а также хламидиозными антигенами.

Таблица 10

Результаты активности гипериммунных сывороток

Вид животных Кол-во голов Антигены Гипериммунные сыворотки

Опр. активность Методы

КРС 5 Вирусов ИРТ 25600+6000 ИФА

КРС 5 ПГ-3 1:12800+2000 ИФА

Овцы 63 Бешенство 1:480+7 РСК

КРС 5 РС 1:12800+2000 ИФА

КРС* 5 Ящура тип А22 3,2+0,1 lg РН

Овцы 45 хламидиоза 1:256-1:1024 РСК

Примечание:*- с вирусом ящура изучали иммуногенную активность вакцин с масляным адъювантом при ревакцинации животных.

Полученные данные позволили получать высокоэффективные специфические гипериммунные сыворотки для изготовления диагностикумов с использованием отобранных адъювантов на разных видах животных без заметных клинических изменений.

2.2.12. Способы получения лечебной ассоциированной гипериммуной сыворотки против пастереллеза, гемофилеза и стрептококкоза свиней с использованием различных видов животных

В последние ноды за рубежом изготавливается целый ряд вакцинных и сывороточных препаратов против гемофилеза, стрептококкоза и пастереллеза, в том числе и ассоциированных.

В нашей стране сывороточные препараты против гемофилеза, пастереллеза и стрептококкоза не разработаны.

Значительный экономический ущерб, наносимый свиноводству гемофилезом, пастереллезом и стрептококкозом, и отсутствие эффективных специфических средств лечения и профилактики этих заболеваний послужило основанием для выполнения работы по разработке нового препарата – гипериммунной сыворотки против гемофилеза, пастереллеза и стрептококкоза свиней.

Исследования по отработке схемы гипериммунизации и получению опытных партий сывороток против гемофилеза, пастереллеза и стрептококкоза свиней проводили на Армавирской биофабрике.

Для этого были сформированы пять групп свиней по пять голов в каждой.

Гипериммунизацию свиней проводили путем внутримышечных инъекций возрастающих доз инактивированных концентрированных гемофилезного, пастереллезного и стрептококкозного антигенов с интервалом в 2-3 дня. При этом антигены вводили раздельно в разные участки тела животного. Через 7-10 дней у свиней брали кровь, получали сыворотку и определяли ее активность в реакции агглютинации (РА). Были испытаны пять схем, отличающихся дозой антигенов и количеством инъекций (таблица 13).

Как показывает таблица 11 (схема 1) гипериммунизация свиней путем 10-ти внутримышечных инъекций в возрастающих дозах инактивированного концентрированного пастереллезного и гемофиллезного антигенов в общем количестве по 1000 млрд. микробных тел (м.т.) каждого антигена, стрептококкового – в общей дозе 1255 млрд.м.т. позволяет получить сыворотку с титрами антител в РА: к P. multocida A, D – 1:400, B – 1:800, к H. pleuropneumoniae 5870 – 1:320, ГУ – 19 – 1:640, к Str. suis Касли – 1:200.

Увеличение числа инъекций больше 10-ти и количества антигенов пастереллезного и гемофилезного больше 1000 млрд.м.т., стрептококкового больше 1255 млрд.м.т. (схема 2, 3) не привело к дольнейшему повышению титра антител сыворотки в РА.

Увеличение количества антигенов и числа инъекций нецелесообразно, так как оказывает дополнительную нагрузку на иммунную систему продуцентов и не выгодна с экономической точки зрения.

Таблица 11

Активность в РА сывороток против гемофилеза, стрептококкоза и пастереллеза свиней, полученных разными способами

1 2 3 4 5

загрузка...