Delist.ru

Молекулярно-генетические маркеры риска генерализованного пародонтита и их применение в диагностике (07.09.2007)

Автор: Николаева Елена Николаевна

Kornman K.S. с соавторами (1997) описали специфический генотип кластера генов интерлейкина-1 (IL - 1), ассоциированный с тяжестью течения пародонтита. Полиморфизм гена IL - 1? локализован в позиции -899, гена IL - 1? – в позиции +3953. В обоих случаях аллель 1 содержит цитозин (С), тогда как аллель 2 – тимин (Т) в соответствующих позициях. Аллель 2 в позиции +3953 гена IL - 1? обусловливает изменение функций белков, что проявляется в избыточной продукции IL - 1?.

Мы изучили полиморфизм генов IL - 1? и IL - 1? у 95 человек европеоидной расы в возрасте от 18 до 65 лет, проживающих в г. Москве: 35 пациентов в возрасте до 35 лет с устойчивым не поддающимся лечению ХГП тяжелой степени (1-я группа), 40 больных ХГП тяжелой степени старше 50 лет (2-я группа) и 20 здоровых людей в возрасте от 41 до 64 лет без видимых заболеваний пародонта (контрольная группа). Все обследованные люди не имели системных заболеваний (ревматоидного артрита, миастении gravis, шизофрении), ассоциированных с полиморфизмом генов IL - 1? или IL - 1?. Все образцы, обладающие, по-крайней мере, одной копией аллеля 2 в обоих локусах считали GenoTypeR PRT – “положительными”. Гомозиготные аллели по обоим локусам или гетерозиготные, хотя бы по одному локусу аллеля 1 относили к “отрицательному” генотипу. Было установлено, что наблюдаемое распределение частот аллелей, как в локусе -899 гена IL - 1? (?2 = 2,54, p > 0,05), так и гена IL - 1? +3953 (?2 = 0,90, p > 0,05) в контрольной группе соответствовало теоретически ожидаемым частотам, рассчитанным по закону Харди - Вейнберга.

Тридцать семь человек (38,9 %) из всех обследованных людей были гомозиготными по аллелю 1 (1/1) в локусе -899 гена IL - 1?, 54 (56,8 %) человека являлись гетерозиготами (1/2) и 4 (4,2%) человека ? гомозиготами по мутантному аллелю 2 (2/2). Гомозиготами по аллелю 1 (1/1) гена IL - 1? +3953 были 43 (45,3 %) человека, по аллелю 2 (2/2) - 9 (9,4 %) человек, а гетерозиготами (1/2) - 43 (45,3 %) человека. Частоты аллельных вариантов локусов IL - 1? -899 и IL - 1? +3953 у больных пародонтитом и в контроле значительно различались. Так, среди пациентов 1 группы (моложе 35 лет) гомозиготные варианты аллеля 1 (1/1) в локусе -899 гена IL - 1? были выявлены у 5 (14 %) из 35 человек и ни у одного пациента в локусе +3953 гена IL - 1?. Во 2 - й группе больных (старше 50 лет) частота гомозиготных аллелей 1/1 была наибольшей, соответственно, 20 из 40 (50 %) в локусе -899 гена IL - 1? и 28 (70 %) из 40 – в локусе +3953 гена IL - 1? (табл. 1).

Максимальная частота – 30 (86 %) из 35 гетерозиготных вариантов аллелей 1/2 обоих генов была выявлена у пациентов 1-й группы. Гомозиготные аллели 2/2 в обоих локусах были определены у 4 (10 %) из 40 пациентов 2-й

Таблица 1

Распределение аллельных частот локусов IL - 1? -899, IL - 1? +3953

у пациентов с пародонтитом и в контрольной группе, n (частота)

Группа

IL - 1? –899 IL - 1?+3953 N

1/1 1/2 2/2 1/1 1/2 2/2

Контроль 12* (0,60)** 8

(0,40) 0

(0,00) 15 (0,75) 5 (0,25) 0 20

До 35 лет 5

(0,14) 30

(0,86) 0

(0,00) 0

(0,00) 30 (0,86) 5

(0,14) 35

Старше 50 лет 20

(0,50) 16

(0,40) 4

(0,10) 28 (0,70) 8 (0,20) 4

(0,10) 40

Всего 37

(0,389) 54

(0,568) 4

(0, 453) 43

(0,453) 43

(0,179) 9

(0,095) 95

группы и у 5 (14 %) пациентов 1-й группы в локусе +3953 гена IL - 1?. большинство людей в контрольной группе (45 %) обладали генотипом 1/1 по обоим изученным локусам генов IL - 1.

Генотипом c одним мутантным аллелем в локусе IL - 1? -899 (1/2, 1/1) обладали 6 (30 %) людей контрольной группы. Еще 3 (15 %) людей имели генотип (1/1, 1/2) с мутантным аллелем в локусе IL - 1? +3953. Генотипом 1/2, 1/2 по обоим изученным локусам генов IL - 1 обладали всего 2 (10 %) человека из группы людей со здоровым пародонтом. Ни один человек этой группы не обладал генотипом с сочетанием мутантных аллелей в гомозиготном состоянии. Частота комбинированного генотипа 1/2, 1/2 у пациентов 1-й группы была значительно выше ? 25/35 (71 %), чем в контрольной группе людей со здоровым пародонтом – 2/20 (10 %), p = 0,0001. Она также была статистически достоверно выше по сравнению с частотой “положительного” генотипа 1/2, 1/2 ? 8/40 (20 %) у пациентов 2-й группы, p = 0,0001. Частота генотипа 1/2, 1/2 у пациентов 2-й группы отличалась незначительно от показателей контрольной группы, p = 0,540. Кроме этого генотип 1/2, 2/2 выявлен еще у 5 (14 %) пациентов 1-й группы, а генотип 2/2, 2/2 – у 4 (10 %) пациентов 2-й группы.

У пациентов с “положительным” генотипом IL - 1 наблюдалось увеличение частоты 29 (69 %) выявления в содержимом пародонтальных карманов P. intermedia в 1,5 раза по сравнению с частотой 15 (45 %) у пациентов с “отрицательным” генотипом (рТКФ = 0,034). Частота идентификации T. denticola у пациентов с “положительным” генотипом IL - 1 ? 24 (58 %) также была в 1,5 раза выше, чем у пациентов с “отрицательным” генотипом ? 13 (39 %), рТКФ = 0,047. Статистически значимые различия были также выявлены и для P. gingivalis: 33 (79 %) и 14 (42 %), соответственно (рТКФ = 0,001). С “положительным” генотипом IL - 1 было также связано повышенное содержание вирусов семейства Herpesviridae в пародонтальных карманах больных ХГП. Так частота выявления HSV 1 типа у 13 (31 %) пациентов с “положительным” генотипом была в 2,6 раза выше, чем у 4 (12 %) больных с “отрицательным” генотипом (рТКФ = 0,019), а EBV в 4,7 раза, соответственно у 12 (29 %) и 2 (6 %) пациентов, рТКФ = 0,006. Связь генотипа IL - 1 с курением не выявлена (рТКФ = 0,437).

Итак, в обследованной нами группе людей частота генотипов 1/2, 1/2, 1/2, 2/2 и 2/2, 2/2 локусов IL - 1? -899 и IL - 1? +3953 составила 46,3 %, что соответствует показателям, характерным для жителей Северной Европы. Мы считаем, что пациенты с данным генотипом относятся к группе риска заболевания тяжелыми формами пародонтита в более молодом возрасте по сравнению с лицами, имеющими “отрицательный” генотип.

У 171 человека: 48 пациентов в возрасте до 35 лет с устойчивым не поддающимся лечению ХГП тяжелой степени (1-я группа), 69 больных ХГП тяжелой степени старше 38 лет (2-я группа) и 54 здоровых человека в возрасте от 20 до 64 лет без видимых заболеваний пародонта (контрольная группа) проведено исследование аллельного полиморфизма генов HLA класса II (DRB1, DQA1, DQB1). Наиболее частыми специфичностями гена DRB1 у представителей контрольной группы были специфичности *01 (28,7 %), *15 (12,9 %), *11 (12,0 %), *03 (8,3 %); аллели локуса DQA1*0101 (30,6 %), *0501 (25,9 %), *0102 (17,6 %) и *0301 (9,3 %); DQB1 *0501 и *0602-8 (каждый 21,3 %), *0301 (20,4 %), *0201 (10,2 %). У больных пародонтитом чаще всего выявляли специфичности *04 (17,9 %), *15 (15,8 %), *07 (12,4 %), *11 (11,5 %), *13 (7,7 %) и *01 (8,9 %); аллели локуса DQA1*0301 (21,8 %), *0102 (20,1 %), *0501 (18,4 %) и *0101 (11,1 %); DQB1*0301 (20,9 %), *0602-8 (17,9 %), *0201 (14,9 %) и *0302 (12,4 %).

Установлено, что у больных пародонтитом наблюдалось снижение частоты специфичности DRB1 *01 и аллеля DQA1 *0101 (pc < 0,05), как в целом, так и в группах с различным течением заболевания. По-видимому, эти специфичности можно отнести к “протективным”. У больных ХГП старше 38 лет (2-я группа) наблюдалось увеличение частоты специфичности DRB1 *04 и аллеля DQA1 *0301 (pcor < 0,05). Выявлены положительные ассоциации данной формы пародонтита с этими показателями (RR > 2). За счет высокой частоты встречаемости специфичности DRB1 *04 и аллеля DQA1 *0301 у пациентов 2-й группы наблюдалась тенденция к увеличению их частоты в целом у обследованных больных пародонтитом.

Нами также были выявлены некоторые различия в системе HLA у пациентов с различными формами пародонтита в зависимости от пола индивидуума. Причем у женщин, страдающих пародонтитом, но не у мужчин, различия были более значимыми.

Анализ распределения частот трехлокусных гаплотипов показал большую вариабельность, чем отдельных генов HLA. При этом было показано, что характер распределения трехлокусных гаплотипов DRB1-DQA1-DQB1 у обследованных нами представителей населения г. Москвы, в целом, соответствует таковому для представителей европеоидной расы. Выявлено 26 наиболее часто встречающихся сочетаний гаплотипов у представителей контрольной группы, составляющих 84 % из всех определенных у них гаплотипов, 23 варианта – у пациентов 1-й (73 %) и 22 – у пациентов 2-й группы (93 %). У пациентов, резистентных к пародонтиту, с наибольшей частотой (17,6 %) определяли гаплотип DRB1*01- DQA1*0101 - DQB1*0501. Отмечена тенденция к снижению его встречаемости до 6,3 % у пациентов 1-й группы (р = 0,024) и 8,7 % – у пациентов 2-й группы (р = 0,052). Наиболее сильные отклонения были показаны для гаплотипа DRB1*04 - DQA1*0301 - DQB1*0302, частота встречаемости которого у пациентов 2-й группы была больше в 5,4 раза, чем в контрольной группе (рсor = 0,052) и 3,2 раза, чем в 1-й группе (р = 0,009, рсor = 0,52).

Кроме этого нами были выявлены различия в распределении частот специфичностей локуса HLA - DRB1 у пациентов с ХГП при наличии (1-я группа) или отсутствии (2-я группа) в пародонтальных карманах генетических маркеров герпесвирусов.

загрузка...